Agência Federal de Educação da Federação Russa
Instituição educacional estadual de ensino profissional superior Bashkir State University
Departamento de Biologia
Departamento de Bioquímica

Trabalho do curso
Métodos para estudar o sistema endócrino em condições normais e patológicas

Concluído:
Aluno do 5º ano do OSE
grupo A
Usachev S. A.

Ufá 2010
Contente
Introdução………………………………………………………………4
1. Revisão dos métodos de estudo do sistema endócrino
normal e patológico………………………………………………………………6
1.1. Breve esboço histórico……………………………………………………...6
1.2. Revisão dos métodos modernos de estudo do sistema endócrino..12
1.3. Métodos modernos de estudo do sistema endócrino
estudo de caso glândula tireóide………………………………28
2. Problemas e perspectivas dos métodos de pesquisa endócrina
sistemas …………………………………………………………… ………… 45
Conclusão……………………………………………………………………..58
Lista de referências…………………………………………………………59

Lista de abreviaturas adotadas na obra
AOK – células formadoras de anticorpos
AG – antígeno
ACTH – hormônio adrenocorticotrófico
HPLC – cromatografia líquida de alta velocidade
HI – hiperinsulinemia compensatória
DNA – ácido desoxirribonucléico
LC – cromatografia líquida
ELISA – imunoensaio enzimático
RI – resistência à insulina
TC – tomografia computadorizada
LH – hormônio luteinizante
EM – síndrome metabólica
MRI – ressonância magnética
PCR – reação em cadeia da polimerase
RIA – radioimunoensaio
RHRT – reação de hipersensibilidade do tipo retardada
SD 2 – diabetes 2º tipo
TSH – hormônio estimulador da tireoide
T4 – tiroxina
T3 – triiodotironina
TBG – teste de globulina de ligação à tiroxina
Ultrassom – exame de ultrassom
FIA – imunoensaio de fluorescência
Mapeamento Doppler colorido
SNC - sistema nervoso central
glândula tireóide - glândula tireóide

Introdução
Nos últimos anos, como resultado do desenvolvimento de métodos mais sutis, sensíveis e específicos para determinação de hormônios e outros métodos para estudar o sistema endócrino na saúde e na doença, a endocrinologia clínica e a bioquímica transformaram-se em grande parte de uma espécie de arte em uma espécie de arte. ramo da química aplicada, fisiologia, física e genética. Este progresso foi possível graças à introdução na prática número grande os métodos mais recentes e de alta tecnologia para estudar o sistema endócrino, isolando e subsequente caracterização biológica e bioquímica de vários hormônios polipeptídicos altamente purificados, esteróides, vitaminas, derivados de pequenos polipeptídeos e aminoácidos, que são classificados como hormônios, bem como obtendo rotulados átomos radioativos hormônios com alta atividade específica.
Relevância do tema:
Atualmente, no limiar do conhecimento do que há de mais oculto e fenômenos misteriosos organismo vivo, a tarefa mais importante é encontrar os métodos de pesquisa mais confiáveis, acessíveis e de alta tecnologia. A nova era da nanotecnologia e das descobertas altamente especializadas começa a dar o seu contributo para a química biológica, que há muito utiliza métodos não só de análise química, mas também as mais modernas tecnologias em todos os ramos da física, informática, matemática e outras ciências. O tempo dita suas condições para a humanidade - conhecer mais profundamente, conhecer profundamente, encontrar a causa dos processos que ocorrem em um organismo vivo em condições normais e patológicas. A busca por novos métodos de pesquisa não para, e o cientista simplesmente não tem tempo para generalizar, sistematizar essa área do conhecimento ou destacar o que precisa no momento. Além disso, quando estudei o problema da pesquisa do sistema endócrino, não encontrei um manual suficientemente completo e generalizador sobre o tema. Muitos pesquisadores, em particular bioquímicos, enfrentam o problema de buscar e sistematizar métodos modernos de estudo do sistema endócrino na saúde e na doença. Isso se deve, em primeiro lugar, ao fato de que a cada dia surgem novas fontes de literatura e novos métodos de pesquisa, mas não existe um único guia de métodos de pesquisa que sistematize os dados sobre os métodos. É por estas razões que a relevância do tema que escolhi é muito elevada.
Objetivo do trabalho:
Sistematizar dados sobre o estado dos métodos de estudo do sistema endócrino em condições normais e patológicas no mundo moderno.
Tarefas:

Faça uma visão histórica do tema.
Refletir o conhecimento atual sobre métodos de estudo do sistema endócrino, sem uma descrição detalhada dos métodos e técnicas de pesquisa.
Descreva os métodos de pesquisa usando o exemplo de uma glândula endócrina.
Destacar os problemas e perspectivas dos métodos modernos de estudo do sistema endócrino na saúde e na doença.

O trabalho da unidade curricular baseia-se no estudo e análise de fontes literárias, é composto por uma introdução, dois capítulos, uma conclusão e uma lista de referências. O volume total do trabalho do curso é de 61 folhas de texto datilografado em formato Microsoft Word 2007, fonte Times New Roman, tamanho 14, espaçamento entre linhas 1,5. O trabalho do curso contém 13 figuras, 2 tabelas, 32 títulos bibliográficos utilizados com links no texto do trabalho. O trabalho vem acompanhado de um resumo em russo e inglês.

1. Revisão dos métodos de estudo do sistema endócrino em condições normais e patológicas
1.1. Breve esboço histórico
O estudo do sistema endócrino e a própria endocrinologia são fenômenos relativamente novos na história da ciência. O sistema endócrino era uma parte inacessível do corpo humano até o início do século XX. Antes disso, os pesquisadores não conseguiam desvendar os segredos das formações endócrinas pelo fato de não conseguirem isolar e estudar os fluidos que elas secretam (“sucos” ou “segredos”). Os cientistas não descobriram nenhum “suco” ou dutos excretores especiais através dos quais o fluido produzido geralmente flui. Portanto, o único método para estudar as funções da glândula endócrina era o método de excisão de parte ou de todo o órgão.
Cientistas e historiadores argumentaram que os órgãos do sistema endócrino no Oriente eram conhecidos nos tempos antigos e os chamavam respeitosamente de “glândulas do destino”. De acordo com os curandeiros orientais, essas glândulas eram receptoras e transformadoras de energia cósmica que fluía para canais invisíveis (chakras) e sustentava a vitalidade humana. Acreditava-se que o trabalho coordenado das “glândulas do destino” poderia ser interrompido por desastres que ocorressem a mando do destino maligno.
A menção de uma doença, provavelmente diabetes, está contida em papiros egípcios de 1500 aC. e.. O bócio e as consequências da castração em animais e humanos pertencem às primeiras descrições clínicas de doenças, cuja natureza endócrina foi posteriormente comprovada. Descrições clínicas antigas de doenças endócrinas foram feitas não apenas no Ocidente, mas também na China e na Índia antigas.
Se organizarmos descobertas significativas em muitas áreas da endocrinologia no tempo, o quadro resultante refletirá em miniatura a história de toda a biologia e medicina. Após observações clínicas fragmentárias feitas na Antiguidade e na Idade Média, estas ciências progrediram de forma extremamente lenta. A segunda metade do século XIX assistiu a rápidos avanços em muitas áreas da medicina, tanto na qualidade da investigação clínica como na compreensão dos mecanismos das doenças. Este processo deveu-se à complexidade da interligação de razões históricas.
Primeiro, a revolução industrial levou à acumulação de capital, que foi utilizado para desenvolver muitas ciências, principalmente a química e a biologia.
Outra revolução ocorrida na segunda metade do século XIX e que foi de fundamental importância para o desenvolvimento não só da endocrinologia, mas também da medicina e da biologia, foi o advento da modelagem animal experimental. Claude Bernard e Oscar Minkowski demonstraram a possibilidade de conduzir experimentos controlados e reprodutíveis em condições de laboratório. Em outras palavras, foi criada a oportunidade de “interrogar” a natureza. Sem o trabalho destes pioneiros, estaríamos privados de grande parte do nosso conhecimento atual no campo da endocrinologia. O estudo de todas essas substâncias chamadas hormônios começou com experimentos em animais inteiros (e muitas vezes precedidos por observações em pessoas doentes). Essas substâncias foram chamadas de substância “X” ou fator “?”. Os postulados de Koch para endocrinologia previam o seguinte procedimento:
1. Remoção da glândula suspeita. Após a retirada de uma glândula endócrina, ocorre um complexo de distúrbios devido à perda dos efeitos reguladores dos hormônios produzidos nessa glândula. Devido à natureza traumática da cirurgia, em vez da remoção cirúrgica da glândula endócrina, pode-se utilizar a introdução de produtos químicos que perturbam sua função hormonal. Por exemplo, a administração de aloxano a animais perturba a função das células β do pâncreas, o que leva ao desenvolvimento de diabetes mellitus, cujas manifestações são quase idênticas às perturbações observadas após a extirpação do pâncreas. 1
2. Descrição dos efeitos biológicos da operação. Por exemplo, a suposição sobre a presença de funções endócrinas no pâncreas foi confirmada nos experimentos de I. Mering e O. Minkowski (1889), que mostraram que sua remoção em cães leva a hiperglicemia e glicosúria graves; os animais morreram dentro de 2-3 semanas. após a cirurgia no contexto de diabetes mellitus grave. Posteriormente, descobriu-se que essas alterações ocorrem devido à falta de insulina, um hormônio produzido no aparelho das ilhotas do pâncreas.
3. Introdução de extrato de glândula.
4. Evidência de que a administração do extrato elimina os sintomas de ausência da glândula.
5. Isolamento, purificação e identificação do princípio ativo.
Durante a Segunda Guerra Mundial, acumulou-se uma grande quantidade de dados no campo da endocrinologia, muitos dos quais foram de fundamental importância para o posterior desenvolvimento da ciência. Após a guerra, devido ao surgimento de muitas novas técnicas, houve uma aceleração geralmente sem precedentes no ritmo da investigação. E agora, como resultado de um forte influxo de forças técnicas e criativas, o número de publicações, tanto sobre endocrinologia como sobre todos os outros aspectos do conhecimento biomédico, está a crescer a um ritmo impressionante. Isto significa um fornecimento constante de novos dados, o que requer revisão periódica de ideias antigas à sua luz. 2
O século XX foi marcado pelo nascimento da ciência dos hormônios, ou endocrinologia. A própria palavra “hormônio” foi introduzida em 1905 pelo fisiologista britânico, professor Ernst Starling, em uma palestra no Royal College of Physicians, em Londres. Foi formado por dois professores da Universidade de Cambridge, cuja palavra grega hormao significa “colocar em movimento rapidamente”, “elevar” ou “excitar”. Starling usou-o para descrever os "transportadores químicos" liberados no sangue pelas glândulas endócrinas (endon - interno + krino - produzir), como os testículos, glândulas supra-renais e glândula tireóide, bem como pelo externo, exócrino (exo - glândulas externas), como glândulas salivares e lacrimais. Esta nova ciência desenvolveu-se muito rapidamente, entusiasmando não só os médicos, mas também a sociedade.
Via de regra, a história do estudo de qualquer hormônio passa por quatro etapas.
Primeiramente, observa-se o efeito produzido no corpo pela secreção secretada pela glândula.
Em segundo lugar, estão sendo desenvolvidos métodos para determinar as secreções internas e o grau de sua influência no corpo. Isso é feito primeiro por meio de testes biológicos para determinar o efeito do hormônio em um organismo deficiente nele. Instalado posteriormente métodos químicos tal medição.
Em terceiro lugar, o hormônio é isolado da glândula e isolado.
E finalmente, em quarto lugar, sua estrutura é determinada por químicos e é sintetizada. 3
Hoje em dia, os investigadores que começam com observações ao nível de todo o organismo têm cada vez mais questões à medida que o seu trabalho avança até tentarem resolver o problema original ao nível molecular. Aqui a pesquisa endocrinológica toma conta das próprias mãos química biológica e sua seção é biologia molecular (endocrinologia).
Assim que surgem novas técnicas morfológicas, químicas, eletrofisiológicas, imunológicas e outras, elas encontram-se muito aplicação rápida em endocrinologia. Por exemplo, nas décadas de 30 e 40, métodos muito complexos foram usados ​​para estudar esteróides. Isto levou a grandes avanços na compreensão da estrutura e da biossíntese dos hormônios esteróides. A possibilidade de utilização de isótopos radioativos, surgida no final dos anos 40-50, ampliou nosso conhecimento sobre muitos aspectos do ciclo do iodo, metabolismo intermediário, transporte de íons, etc. o sangue e acumular certo composto. Sabe-se, por exemplo, que a glândula tireóide absorve ativamente o iodo, que é então utilizado para a síntese de tiroxina e triiodotironina. Com a hiperfunção da glândula tireoide, o acúmulo de iodo aumenta; com a hipofunção, observa-se o efeito oposto. A intensidade do acúmulo de iodo pode ser determinada pela introdução do isótopo radioativo 131I no corpo, seguida pela avaliação da radioatividade da glândula tireóide. Compostos que são utilizados para a síntese de hormônios endógenos e estão incluídos em sua estrutura também podem ser introduzidos como marcador radioativo. Posteriormente, é possível determinar a radioatividade de diversos órgãos e tecidos e assim avaliar a distribuição do hormônio no organismo, bem como encontrar seus órgãos-alvo.
Mais tarde, uma combinação de eletroforese em gel de policrilamida e autorradiografia foi usada de forma criativa para estudar muitas proteínas, incluindo receptores hormonais. Simultaneamente a esses impressionantes avanços na química, o uso de métodos histoquímicos, imuno-histoquímicos e de microscopia eletrônica revelou-se ainda mais frutífero.
Todas as variantes de cromatografia – coluna, camada fina, papel, multidimensional, gás-líquido (com ou sem espectrometria de massa), líquida de alto desempenho – foram usadas pelos endocrinologistas imediatamente após sua introdução. Eles permitiram obter informações importantes não só sobre a sequência de aminoácidos de peptídeos e proteínas, mas também sobre lipídios (principalmente prostaglandinas e substâncias relacionadas), carboidratos e aminas.
À medida que as técnicas de pesquisa biológica molecular são desenvolvidas, os endocrinologistas as utilizam rapidamente para estudar os mecanismos de ação hormonal. Atualmente, o método do DNA recombinante é utilizado não só para esse fim, mas também para a produção de hormônios proteicos. Na verdade, é difícil nomear um método bioquímico ou fisiológico que não seja adotado pelos endocrinologistas. 4

1.2. Revisão dos métodos modernos de estudo do sistema endócrino
No exame de pacientes com suspeita de patologia endócrina, além da coleta de anamnese da doença, exame e queixas do paciente, são utilizados os seguintes métodos diagnósticos: métodos laboratoriais gerais (clínicos e bioquímicos), estudos hormonais, métodos instrumentais, métodos de genética molecular.
Na maioria dos casos estudo hormonal não tem uma chave, mas um valor verificador para fazer um diagnóstico. Os testes hormonais não são utilizados para diagnosticar uma série de doenças endócrinas (diabetes insipidus e diabetes mellitus); em alguns casos, os testes hormonais têm valor diagnóstico apenas em combinação com indicadores bioquímicos (nível de cálcio no hipertireoidismo).
Um estudo hormonal pode revelar diminuição da produção de um determinado hormônio, aumento e seu nível normal (Tabela 1). Mais comumente usado em prática clínica métodos para determinar hormônios são várias modificações método radioimune . Estes métodos baseiam-se no facto de a hormona radiomarcada e a hormona contida no material de teste competirem entre si pela ligação a anticorpos específicos: quanto mais uma determinada hormona estiver contida no material biológico, menos moléculas hormonais marcadas se ligarão, uma vez que o número de locais de ligação hormonal na amostra constantemente. Há mais de 20 anos, Berson e Yalow propuseram um método de radioimunoensaio para determinação de insulina.
Este método foi baseado na observação de que em sangue periférico Em pacientes diabéticos tratados com insulina, existe uma proteína (que mais tarde se revelou ser uma globulina) que se liga à insulina, marcada com 131I. A importância destes dados e o subsequente desenvolvimento de um radioimunoensaio para a determinação da insulina é enfatizado pela atribuição do Prémio Nobel a Yalow e Berson.
Logo após os relatos iniciais desses pesquisadores, métodos correspondentes para a determinação de outros hormônios foram desenvolvidos e descritos por outros laboratórios. Esses métodos utilizam anticorpos ou proteínas séricas que se ligam a um hormônio ou ligante específico e carregam um hormônio radiomarcado que compete com o hormônio padrão ou hormônio presente na amostra biológica.
Princípio método radiorreceptor essencialmente não é diferente do radioimunoensaio, apenas o hormônio, em vez de se ligar aos anticorpos, se liga a um receptor hormonal específico na membrana plasmática ou no citosol. Os receptores específicos para a maioria dos hormônios polipeptídicos estão localizados na superfície externa da membrana plasmática das células, enquanto os receptores para esteróides biologicamente ativos, bem como para tiroxina e triiodotironina, estão localizados no citosol e nos núcleos. A sensibilidade da análise de radiorreceptores é inferior à do radioimunoensaio e à da maioria dos métodos biológicos em sistemas in vitro. Para interagir com o seu receptor, o hormônio deve ter a conformação adequada, ou seja, ser biologicamente ativo. É possível que um hormônio perca a capacidade de se ligar ao seu receptor, mas continue a interagir com os anticorpos no sistema de radioimunoensaio. Esta discrepância reflecte o facto de os anticorpos e receptores “reconhecerem” diferentes partes da molécula hormonal.
Vários métodos de radiorreceptores para análise hormonal foram propostos. Normalmente, é obtido tecido de órgãos específicos para um determinado hormônio e os receptores são isolados dele usando técnicas padrão. Os receptores isolados da membrana plasmática nos sedimentos são relativamente estáveis ​​quando armazenados a temperaturas inferiores a -20°C. Porém, receptores solubilizados de hormônios polipeptídicos e esteróides, isolados das membranas plasmáticas ou do citosol e não associados a ligantes, revelam-se instáveis, o que se manifesta por uma diminuição na capacidade de ligação de hormônios específicos, mesmo que tenham sido armazenados congelados. por um tempo relativamente curto.
Recentemente, os métodos não radioativos tornaram-se mais difundidos. Como método padrão para a determinação de vários compostos em química clínica, imunoensaio , caracterizado por boa sensibilidade, especificidade e ampla gama de aplicações. Em particular, o imunoensaio é usado para determinar hormônios. Esses métodos incluem:

1) ensaio imunoenzimático (ELISA), ELISA de fase sólida tipo ELISA ou ELISA homogêneo tipo EMIT.

2) imunoensaio de fluorescência (FIA), baseado na medição do aumento, extinção ou polarização da fluorescência ou no estudo da fluorescência com resolução no tempo.

3) imunoensaio bio ou quimioluminescente.

A técnica deve:
1) ser aplicável tanto para análise imunométrica de proteínas em dois locais quanto para ensaios competitivos diretos de haptenos com base no princípio de ligação.
2) ter sensibilidade, precisão e faixa de trabalho adequadas de concentrações determinadas com dispersão mínima de resultados em toda a faixa.
3) fácil de melhorar para aumentar ainda mais a sensibilidade e simplificar a análise.
Potencialmente, a técnica deverá ter a possibilidade de seu aprimoramento e aplicação às análises de outras substâncias, análises extralaboratoriais e sem separação e à determinação simultânea de diversas substâncias (o chamado imunoensaio múltiplo). Os métodos ideais de imunoensaio são mais parecidos com os métodos luminescentes ou de fotoemissão, nos quais o marcador é detectado pelo registro da emissão de luz.
Luminescência é a emissão de luz por uma substância em estado eletronicamente excitado. Existem vários tipos de luminescência, diferindo apenas nas fontes de energia que transferem elétrons para um estado excitado, ou seja, para um nível de energia mais elevado, nomeadamente:
1) Radioluminescência, em que a excitação do fluoróforo correspondente é obtida pela absorção da energia liberada durante o processo de decaimento radioativo irreversível. O fluoróforo excitado emite luz, retornando ao estado fundamental.
2) Quimioluminescência, em que a excitação é alcançada como resultado de uma reação química (geralmente uma reação de oxidação irreversível). Se reação química realizado em sistemas biológicos sob a ação de enzimas, então neste caso costuma-se utilizar o termo bioluminescência. Se uma reação química é iniciada por um aumento na temperatura dos reagentes, então esse tipo de luminescência é denominado termoquimioluminescência, mas se a reação é iniciada por um potencial elétrico, então o fenômeno correspondente é denominado eletroquimioluminescência.
3) Fotoluminescência, em que a excitação é causada por fótons de luz infravermelha, visível ou ultravioleta. A fotoluminescência pode ser subdividida em fluorescência, onde a molécula excitada retorna rapidamente ao seu estado original através de um estado singleto, e fosforescência, onde a molécula excitada retorna ao seu estado original através de um estado tripleto. A emissão de fosforescência decai muito mais lentamente. Os quanta de luz emitidos têm um comprimento de onda longo. A fotoluminescência difere da radio e quimioluminescência porque geralmente é reversível e, portanto, pode ser induzida repetidamente em um determinado sistema (uma vez que a formação de um intermediário excitado e sua subsequente inativação por emissão de luz não leva a transformações químicas).
Além desses métodos, os métodos químicos para a determinação de uma série de substâncias (geralmente metabólitos de hormônios e seus precursores) não perderam completamente sua importância. Eles são frequentemente usados ​​para purificar frações de proteínas e estudar hormônios. cromatografia . Achados de cromatografia líquida ampla aplicação como um método analítico rápido e seletivo para a separação e identificação de diversas substâncias. A cromatografia líquida (LC) em sua versão clássica (à pressão atmosférica) e de alta velocidade ou HPLC a pressão elevada é o método ideal para analisar moléculas quimicamente e termicamente instáveis, substâncias de alto peso molecular com volatilidade reduzida, o que é explicado pelo papel especial da fase móvel: em contraste com o eluente gasoso na química líquida, desempenha não apenas uma função de transporte. A natureza e a estrutura dos componentes da fase móvel controlam o comportamento cromatográfico das substâncias separadas. Entre os objetos mais típicos da cromatografia líquida estão proteínas, ácidos nucléicos, aminoácidos, corantes, polissacarídeos, explosivos, drogas, metabólitos vegetais e animais. A cromatografia líquida, por sua vez, é dividida em adsorção líquida (a separação dos compostos ocorre devido à sua diferente capacidade de serem adsorvidos e dessorvidos da superfície do adsorvente), líquido-líquido ou distribuição (a separação é realizada devido à diferente solubilidade na fase móvel - eluente e fase estacionária, sorvida fisicamente ou enxertada quimicamente na superfície de um adsorvente sólido), cromatografia de troca iônica, onde a separação é obtida através da interação reversível das substâncias ionizantes analisadas com os grupos iônicos do sorvente - íon permutador. Um lugar especial no uso de métodos de cromatografia líquida na medicina é ocupado pela exclusão de tamanho ou cromatografia em gel e cromatografia de afinidade ou bioespecífica. Esta versão da LC baseia-se no princípio de separar uma mistura de substâncias de acordo com os seus pesos moleculares. Na cromatografia de exclusão (da exclusão inglesa - exceção; nome desatualizado - peneira), as moléculas de substâncias são separadas por tamanho devido à sua diferente capacidade de penetrar nos poros do sorvente. A fase móvel é um líquido e a fase estacionária é o mesmo líquido que preencheu os poros do sorvente (gel). Se esses poros forem inacessíveis às moléculas do analito, então o composto correspondente sairá da coluna mais cedo do que aquele com tamanhos moleculares menores. Moléculas ou íons cujos tamanhos estão entre os diâmetros máximo e mínimo dos poros do gel são divididos em zonas separadas. A cromatografia de exclusão de tamanho recebeu um desenvolvimento particularmente intenso nas últimas duas décadas, o que foi facilitado pela introdução na prática química e bioquímica do Sephadex - géis de dextrano reticulados com epicloridrina. Em vários tipos de Sephadex, produtos químicos com diferentes pesos moleculares podem ser fracionados, por isso são amplamente utilizados para o isolamento e purificação de biopolímeros, peptídeos, oligo e polissacarídeos, ácidos nucléicos e até células (linfócitos, eritrócitos), na produção industrial de várias preparações proteicas, em particular enzimas e hormonas. 5 A cromatografia de afinidade é caracterizada pela seletividade extremamente alta inerente às interações biológicas. Freqüentemente, um procedimento cromatográfico pode purificar a proteína desejada milhares de vezes. Isto justifica o esforço necessário para preparar um sorvente de afinidade, o que nem sempre é uma tarefa fácil devido ao risco de as moléculas biológicas perderem a capacidade de interagir especificamente durante a sua ligação covalente à matriz. 6
Ao estudar o estado funcional das glândulas endócrinas, são utilizadas as seguintes abordagens metodológicas:
1. Determinação do nível inicial de um determinado hormônio.
2. Determinação do nível hormonal ao longo do tempo, levando em consideração o ritmo circadiano de secreção.
3. Determinação do nível hormonal nas condições de um teste funcional.
4. Determinação do nível do metabólito hormonal.

Tabela 1. Patogênese das doenças endócrinas 7

Na maioria das vezes, na prática clínica, é utilizada a determinação do nível basal de um hormônio específico. O sangue geralmente é coletado com o estômago vazio pela manhã, embora a ingestão de alimentos não afete a produção de muitos hormônios. Para avaliar a atividade de muitas glândulas endócrinas (tireóide, paratireóide), avaliar o nível basal de hormônios é suficiente. Ao determinar o nível basal de um hormônio, podem surgir certas dificuldades devido à circulação no sangue de várias formas moleculares do mesmo hormônio. Em primeiro lugar, trata-se do hormônio da paratireóide.
A maioria dos hormônios circula no sangue ligado a proteínas transportadoras. Como regra, o nível de hormônio livre e biologicamente ativo no sangue é dezenas ou centenas de vezes menor que o nível total do hormônio.
Os níveis da maioria dos hormônios apresentam uma dinâmica diária característica (ritmo circadiano de secreção), e muitas vezes essa dinâmica adquire significado clínico. O mais importante e ilustrativo a esse respeito é a dinâmica da produção de cortisol (Fig. 1.1). 8

Outros exemplos nesse sentido são a prolactina e o hormônio do crescimento, cujo ritmo de secreção também é determinado pelo ciclo sono-vigília. A patogênese de uma série de doenças endócrinas baseia-se na perturbação do ritmo circadiano da produção hormonal.
Além do ritmo circadiano, a maioria dos parâmetros biológicos pode ser refletida no nível do hormônio no sangue. Para muitos hormônios, os valores de referência dependem em grande parte da idade (Fig. 1.2)9, sexo e fase do ciclo menstrual.

O nível de vários hormônios pode ser influenciado não apenas por doenças somáticas concomitantes e medicamentos tomados para elas, mas também por fatores como estresse (cortisol, adrenalina), características ambientais (níveis de tiroxina em regiões com diferentes consumos de iodo) e o composição dos alimentos ingeridos no dia anterior (peptídeo C) e muitos outros.
O princípio fundamental para avaliar a atividade dos dependentes da hipófise ( tireoide, córtex adrenal, gônadas) e uma série de outras glândulas endócrinas é a determinação dos chamados pares diagnósticos de hormônios. Na maioria dos casos, a produção hormonal é regulada por um mecanismo de feedback negativo. O feedback pode ocorrer entre hormônios pertencentes ao mesmo sistema (cortisol e ACTH), ou entre hormônios e seu efetor biológico (hormônio da paratireóide e cálcio). Além disso, não precisa haver interação direta entre os hormônios que compõem a dupla. Às vezes é mediada por outros fatores humorais, eletrólitos e parâmetros fisiológicos (volume de fluxo sanguíneo renal, nível de potássio e angiotensina para o par renina-aldosterona). Uma avaliação isolada dos indicadores que compõem um par pode levar a uma conclusão errônea.
Apesar do aprimoramento dos métodos de análise hormonal, os testes funcionais ainda apresentam grande valor diagnóstico no diagnóstico de endocrinopatias. Os testes funcionais são divididos em estimulação e supressivos (supressivos). O princípio geral dos testes é que os testes de estimulação são prescritos para suspeita de insuficiência da glândula endócrina e os testes supressivos são prescritos para suspeita de hiperfunção.
Juntamente com a avaliação do nível de hormônios no sangue, em alguns casos a determinação de sua excreção na urina pode ter um certo valor diagnóstico. O valor diagnóstico desses estudos, por exemplo, determinando a excreção de cortisol livre, é significativamente menor do que os testes funcionais modernos. Da mesma forma, o uso da determinação da excreção de metabólitos hormonais cessou quase completamente, sendo a única exceção a determinação do nível de metabólitos de catecolaminas para o diagnóstico de feocromocitoma.
Nos últimos anos amplo uso recebeu métodos totalmente automatizados para pesquisa hormonal, o que reduz o número de erros como coleta incorreta de sangue, armazenamento, entrega e outros “fatores humanos”.
De métodos instrumentais Os estudos mais comumente utilizam ultrassonografia (US), radiografia, tomografia computadorizada (TC) e ressonância magnética (RM). Além disso, métodos especiais são utilizados em endocrinologia: angiografia com amostragem seletiva de sangue que flui da glândula endócrina, estudo de radioisótopos (cintilografia da tireoide), densitometria óssea. Básico métodos instrumentais, utilizados para estudar as glândulas endócrinas são apresentados na Tabela 2.
Métodos de pesquisa genética molecular.
O rápido desenvolvimento da ciência nas últimas décadas e as pesquisas no campo da biologia molecular, genética médica, bioquímica, biofísica, intimamente interligadas com microbiologia, imunologia, oncologia, epidemiologia, etc., levaram à criação e implementação ativa de moleculares métodos de laboratórios de diagnóstico biológico para pesquisar o genoma de humanos, animais, plantas, bactérias e vírus. Esses métodos são mais frequentemente chamados de pesquisa de DNA.
Os métodos de pesquisa de DNA permitem o diagnóstico precoce e mais completo de várias doenças, o diagnóstico diferencial oportuno e o monitoramento da eficácia da terapia. O desenvolvimento ativo de métodos de diagnóstico de DNA e sua introdução na prática sugere que não está longe o momento em que esses métodos estreitarão significativamente o escopo das tarefas dos estudos diagnósticos mais tradicionais, como os métodos citogenéticos, e talvez os desloquem da medicina prática para a esfera científica.

Tabela 2. Métodos instrumentais básicos
pesquisa de glândulas endócrinas 10

Atualmente, existem duas áreas de diagnóstico de DNA: análise de hibridização de ácidos nucléicos e diagnóstico por reação em cadeia da polimerase.
O PCR foi imediatamente introduzido na prática, o que permitiu elevar o diagnóstico médico a um nível qualitativamente novo. O método se tornou tão popular que hoje é difícil imaginar trabalhar na área de biologia molecular sem seu uso. Desenvolvimento particularmente rápido Método PCR recebido graças ao programa internacional “Genoma Humano”. Foram criadas tecnologias modernas de sequenciamento (decifração de sequências de nucleotídeos de DNA). Se no passado recente demorava uma semana para decifrar o DNA de 250 pares de nucleotídeos (pb), os sequenciadores automáticos modernos podem determinar até 5.000 pb. por dia. Isto, por sua vez, contribui para o crescimento significativo de bases de dados contendo informações sobre sequências de nucleotídeos no DNA. Atualmente, várias modificações da PCR foram propostas, dezenas de aplicações diferentes do método foram descritas, incluindo “long-PCR”, que permite copiar sequências de DNA ultralongas. Pela descoberta da PCR, K. W. Mullis recebeu o Prêmio Nobel de Química em 1993.
Todas as abordagens para diagnóstico genético podem ser divididas em vários grupos principais:
1. Métodos para identificar seções específicas de DNA.
2. Métodos para determinar a sequência primária de nucleotídeos no DNA.
3. Métodos de determinação do conteúdo de DNA e análise do ciclo celular. onze
A PCR permite encontrar no material em estudo uma pequena seção de informação genética contida em uma sequência específica de nucleotídeos de DNA de qualquer organismo entre um grande número de outras seções de DNA e multiplicá-la muitas vezes. PCR é um análogo “in vitro” da reação bioquímica de síntese de DNA em uma célula.
A PCR é um processo cíclico, em cada ciclo do qual ocorre a desnaturação térmica da fita dupla do DNA alvo, subsequente adição de primers oligonucleotídicos curtos e sua extensão usando DNA polimerase por adição de nucleotídeos. Como resultado, acumula-se um grande número de cópias do DNA alvo original, que são facilmente detectadas.
A descoberta da PCR resultou na utilização prática imediata do método. Em 1985, foi publicado um artigo que descrevia um sistema de teste baseado em PCR para o diagnóstico de anemia falciforme. Desde 1986. Até o momento, mais de 10.000 publicações científicas foram dedicadas à PCR. As perspectivas de utilização do PCR parecem mais do que impressionantes. 12
Métodos de pesquisa citoquímica.
Estes métodos são variantes dos estudos biológicos in vitro descritos. Eles geralmente têm maior sensibilidade que os métodos de radioimunoensaio, mas são muito mais complicados e caros por determinação. Os resultados dos estudos biológicos citoquímicos são avaliados quantitativamente em cortes histológicos por meio de um dispositivo especial - um microdensitômetro.
As seções histológicas são preparadas a partir de tecidos específicos de hormônios ou células-alvo que foram previamente expostas a diferentes concentrações do hormônio padrão e do hormônio teste. Usando um densitômetro, uma área com diâmetro de 250 - 300 nm é escaneada para quantificar a reação de cor causada por uma mudança no estado redox do objeto sob a influência da estimulação hormonal. Para análise quantitativa, são utilizados corantes histológicos sensíveis a essas alterações.
O primeiro sistema de ensaio biológico citoquímico foi desenvolvido para ACTH, e o tecido alvo neste sistema foi o córtex adrenal. Outros métodos para a determinação biológica do ACTH são demasiado insensíveis ou requerem grandes volumes de plasma. Assim, a determinação citoquímica do estado redox do tecido é um meio valioso de analisar a função normal e alterada do sistema hipotálamo-hipófise-adrenal com base nos níveis de ACTH.
Foi desenvolvido um método citoquímico para determinação de LH, mas foram encontradas dificuldades significativas associadas a flutuações significativas nos resultados de diferentes determinações e à sensibilidade variável do objeto, o que pode refletir diferenças biológicas conhecidas em diferentes animais. Métodos citoquímicos específicos sensíveis foram propostos para a determinação do hormônio da paratireóide, ADH e tireotropina.
Com maior sofisticação dos equipamentos, o que aumentará o número de estudos em uma determinação, este método poderá encontrar aplicação mais ampla. É especialmente atraente porque não requer o uso de compostos radioativos. Os métodos citoquímicos não são amplamente utilizados na clínica e são utilizados principalmente como um método sensível em pesquisas científicas. 13

1.3. Métodos modernos de estudo do sistema endócrino usando o exemplo do estudo da glândula tireóide
Em meu trabalho, de escopo limitado, considerarei métodos modernos de estudo do sistema endócrino em condições normais e patológicas usando o exemplo do estudo da glândula endócrina, que é relevante devido à alta prevalência de doenças da tireoide na República do Bashkortostan.
1. Exame ultrassonográfico.
O ultrassom permite verificar dados de palpação bastante subjetivos. Sensores com frequência de 7,5 MHz e 10 MHz são ideais para pesquisa. Atualmente é utilizado o mapeamento Doppler colorido, que permite a visualização de pequenos vasos da glândula tireoide e fornece informações sobre a direção e velocidade média do fluxo. As capacidades do método dependem da experiência e qualificação do especialista que conduz a pesquisa. O princípio do método é que o ultrassom, enviado em pulsos frequentes, penetra nos órgãos humanos, é refletido na interface entre meios com diferentes resistências ultrassônicas, é percebido pelo aparelho e reproduzido na tela e no papel ultravioleta. O método é inofensivo e não tem contra-indicações (Fig. 1.3).

Figura 1.3. Ultrassonografia da glândula tireóide.
Hoje em dia complexo ultrassonografia usando mapeamento Doppler colorido (CDC), (Fig. 1.4). 14

Arroz. 1.4. AIT com formação de nódulos tireoidianos na modalidade CD.
2. Biópsia por punção com agulha fina da glândula tireoide.
A biópsia da glândula tireoide com agulha fina é o único método pré-operatório para avaliar diretamente as alterações estruturais e estabelecer os parâmetros citológicos das formações na glândula tireoide. A eficiência de obtenção de material citológico adequado durante a biópsia por punção com agulha fina aumenta significativamente se esse procedimento diagnóstico for realizado sob controle ultrassonográfico, que permite identificar as áreas mais alteradas da glândula tireoide, bem como selecionar a direção e profundidade ideais da punção. 15

3. Exame citológico.
O diagnóstico citológico das formações da glândula tireoide baseia-se em um conjunto de determinadas características, como a quantidade de material obtido, sua composição celular, características morfológicas das células e seus grupos estruturais, qualidade do esfregaço, etc.
4. Estudo de radioisótopos (varredura), cintilografia.
A varredura de radioisótopos (varredura) é um método de obtenção de uma imagem bidimensional que reflete a distribuição de um radiofármaco em vários órgãos por meio de um scanner.


Figura 1.6. Resultado da varredura de radioisótopos
glândula tireóide

A varredura permite determinar o tamanho da glândula tireoide, a intensidade de acúmulo de iodo radioativo nela e em suas áreas individuais, o que permite avaliar o estado funcional de toda a glândula e das formações focais (Fig. 1.6).
Cintilografia- um método de imagem funcional, que consiste na introdução no corpoisótopos radioativose obtenção de uma imagem determinando a emissão radiação . O paciente é dado indicador de rádio - um medicamento que consiste em uma molécula vetorial e um marcador radioativo. A molécula vetorial é absorvida por uma determinada estrutura do corpo (órgão, líquido). A etiqueta radioativa serve como “transmissor”: emite raios gama, que são registrados por uma câmera gama. A quantidade de radiofármaco administrada é tal que a radiação que ele emite é facilmente captada, mas não apresenta efeito tóxico ao organismo.
Para cintilografia da tireoide, o isótopo de tecnécio mais comumente usado é o 99m Tc-pertecnetato. O uso de iodo 131 é limitado à identificação de metástases funcionais de câncer de tireoide. Para diagnosticar bócio subesternal e aberrante, bem como em alguns casos de hipotireoidismo congênito (aterose, distopia, defeito de organização), utiliza-se iodo 123. 16
5. Determinação dos níveis de TSH e hormônio tireoidiano.
Um estudo do nível de TSH e hormônios tireoidianos (tiroxina livre e triiodotironina) é indicado para todos com suspeita de patologia tireoidiana. Atualmente, é mais conveniente estudar as frações livres dos hormônios tireoidianos em combinação com a determinação do nível de TSH.
6. Determinação do nível de tireoglobulina no sangue.
Um conteúdo aumentado de tireoglobulina no sangue é característico de muitas doenças da tireoide; é detectado 2 a 3 semanas após uma biópsia por punção, bem como 1 a 2 meses após a cirurgia na glândula tireoide.
7. Determinação do nível de calcitonina no sangue.
Em pacientes com história familiar de câncer medular de tireoide (síndrome de neoplasia endócrina múltipla tipos 2 e 3), deve-se obrigatório determinar o nível de calcitonina no sangue. Em todos os outros casos, a determinação da calcitonina não está indicada.
O nível normal de calcitonina no sangue não excede 10 pg/ml. O nível deste marcador, superior a 200 pg/ml, é o critério diagnóstico mais importante para o câncer medular de tireoide.

8. Teste de função tireoidiana.
Os testes de função tireoidiana são exames de sangue usados ​​para avaliar a eficácia do funcionamento da glândula tireoide. Esses testes incluem o teste do hormônio estimulante da tireoide (TSH), teste de tiroxina (T4), teste de triiodotironina (T3), teste de globulina de ligação à tiroxina (TBG), teste de alcatrão de triiodotironina (T3RU) e teste de estimulante da tireoide de longo prazo (LATS). .
Os testes de função tireoidiana são usados ​​para:

ajudar no diagnóstico de uma glândula tireoide hipoativa (hipotireoidismo) e uma glândula tireoide hiperativa (hipertireoidismo)
avaliação da atividade da tireóide
monitorar a resposta à terapia da tireoide

A maioria considera sensível teste de hormônio estimulador da tireoide (TSH) o indicador mais preciso da atividade da tireóide. Ao medir os níveis de TSH, os médicos podem detectar até mesmo problemas menores na glândula tireoide. Como este teste é muito sensível, anormalidades na função tireoidiana podem ser detectadas antes que o paciente comece a reclamar dos sintomas.
O TSH diz à glândula tireóide para liberar os hormônios tiroxina (T4) e triiodotironina (T3). Antes de usar os testes de TSH, foram usados ​​exames de sangue padrão que mediam os níveis de T4 e T3 para determinar se a glândula tireoide estava funcionando corretamente. O teste de triiodotironina (T3) mede a quantidade desse hormônio no sangue. O T3 geralmente está presente em quantidades muito pequenas, mas tem um efeito significativo no metabolismo. É um componente ativo dos hormônios da tireoide.

Teste de globulina ligadora de tiroxina (TBG) testa os níveis desta substância no sangue, que é produzida no fígado. O GTD liga-se ao T3 e ao T4, impedindo que os hormônios sejam eliminados do sangue pelos rins e liberando-os quando e onde são necessários para regular as funções do corpo.
Teste de captação de alcatrão de triiodotironina (T3RU) mede os níveis de T4 no sangue. Análise laboratorial Esse teste leva vários dias para ser concluído e é usado com menos frequência do que testes cujos resultados ficam disponíveis mais rapidamente.
Teste de estimulador de tireoide de longa ação (LATS) indica se o sangue contém um estimulante da tireoide de ação prolongada. Se estiver presente de forma anormal no sangue, o LATS faz com que a tireoide produza e libere quantidades anormalmente grandes de hormônios.
9. Computador, ressonância magnética, tomografia óptica de transmissão.

A tomografia computadorizada e a ressonância magnética são métodos não invasivos altamente informativos que visualizam a glândula tireoide. No entanto, atualmente esses estudos são realizados muito raramente devido ao alto custo e à baixa disponibilidade de equipamentos adequados. Além de avaliar a localização da glândula tireoide, seus contornos, forma, tamanho, estrutura, relação com tecidos adjacentes, tamanho e estrutura dos linfonodos regionais, a TC permite determinar a densidade densitométrica das formações na glândula tireoide. Tanto a tomografia computadorizada quanto a ressonância magnética são os métodos de escolha no diagnóstico do bócio subesternal. A tomografia computadorizada (TC) é um método de exame radiográfico baseado na absorção desigual da radiação radiográfica por diversos tecidos do corpo, utilizado principalmente no diagnóstico de patologias da tireoide, área abdominal(fígado, vesícula biliar, pâncreas, rins, glândulas supra-renais, etc.)
A tomografia computadorizada permite obter informações sobre a configuração, tamanho, localização e extensão de qualquer formação, pois esse método diferencia tecidos duros e moles por densidade.
A ressonância magnética (MRI) é um método diagnóstico instrumental usado em endocrinologia para avaliar a condição do sistema hipotálamo-hipófise-adrenal, esqueleto, órgãos abdominais e pélvicos.
A ressonância magnética permite obter informações sobre a configuração dos ossos, tamanho, localização e extensão de qualquer formação, pois esse método diferencia tecidos duros e moles por densidade.
A ressonância magnética, nos últimos anos, tornou-se cada vez mais importante no diagnóstico de patologia da região hipotálamo-hipófise e está se tornando o método de escolha no exame de pacientes com suspeita de lesões nesta área específica (Fig. 1.7).


Figura 1.7. Preparando-se para uma ressonância magnética.
Durante a ressonância magnética, uma mesa móvel com o paciente se move através de um “túnel” que gera um campo eletromagnético, que por sua vez cria uma radiação que permite obter uma imagem tridimensional da estrutura interna do corpo.

Doenças diagnosticadas por ressonância magnética:

? tumores hipofisários (por exemploprolactinoma , doença de Itsenko-Cushing)

? massas adrenais (por exemplo, síndrome de Cushing, aldosteroma, feocromocitoma)

? osteoporose

? e etc.

Vantagens da ressonância magnética:

? permite obter seções de 2-3 mm de espessura em qualquer plano

? a capacidade de julgar pela natureza do sinal não apenas a presença de uma formação, mas também sua estrutura interna (hemorragias, cistos, etc.)

? ausência de exposição do paciente à radiação ionizante e inocuidade quase total, o que é importante no exame de crianças, bem como, se necessário, exames repetidos e repetidos.

Um método de tomografia ainda mais moderno, mas ainda não amplamente introduzido na prática, é a tomografia óptica de transmissão (TOT), que utiliza radiação infravermelha próxima de baixa potência (da ordem de dezenas de mW) que é praticamente inofensiva para os seres humanos (Fig. .1.8.). Os benefícios potenciais do TOT vão muito além da sua segurança. O uso da radiação IR, que é bem absorvida pela hemoglobina nos estados oxi e desoxi (em diferentes comprimentos de onda), permite obter uma distribuição espacial do grau de oxigenação dos tecidos, o que é impossível em outros métodos. A utilização de radiação com comprimentos de onda específicos também permitirá determinar a distribuição espacial de NAD, NAD + (NADH), triptofano, diversos citocromos (bilirrubina, melanina, citocromo oxidase) e concentração de água. Tudo isto permite não só diagnosticar com sucesso e atempadamente uma série de doenças (displasia, tumores, trombose, hematomas), mas também obter informações sobre os processos metabólicos e o funcionamento de vários órgãos ao longo do tempo. Em particular, a tomografia óptica permitirá observar em tempo real a distribuição espacial da saturação dos tecidos com água e do fator pH. 17

Arroz. 1.8. O sistema CTLM é um dos primeiros tomógrafos ópticos seriais do mundo.
10. Estudo imuno-histoquímico do tecido tumoral da tireoide.
Eles são realizados no tecido de tumores da tireoide obtidos em cirurgia. O objetivo principal deste estudo é prognóstico. No tecido tireoidiano é determinada a presença de substâncias como p53 (gene supressor de crescimento tumoral), CD44, Met (proteoglicanos responsáveis ​​pela metástase), PTC, ras-oncogenes (oncogenes que regulam a progressão tumoral) e outros. O mais importante na prática clínica é a detecção da imunorreatividade p53, Conheci e PTC em tecido de câncer de tireoide. A presença desses marcadores no tecido tumoral é um sinal de desenvolvimento rápido (dentro de 2 a 5 meses) de doença metastática no paciente operado. O estudo é caro e requer equipamento laboratorial especial. Actualmente, a determinação de marcadores tumorais é efectuada principalmente em clínicas oncológicas especializadas para determinadas indicações, nomeadamente, se o doente apresentar outros sinais prognósticos de recorrência tumoral ou de desenvolvimento de doença metastática (cancro da tiróide pouco diferenciado, idade do doente superior a 55 anos, invasão dos tecidos circundantes pelo tumor e etc.). 18
11. Métodos imunológicos.
Os métodos imunológicos incluem principalmente o ensaio imunoenzimático (ELISA). ELISA é um método de detecção de antígenos ou anticorpos, baseado na determinação do complexo antígeno-anticorpo devido a:

fixação preliminar do antígeno ou anticorpo no substrato;
adicionar a amostra de teste e ligar o antígeno ou anticorpo fixo ao antígeno alvo ou anticorpo alvo;
adição posterior de antígeno ou anticorpo marcado com marcador enzimático com sua detecção por meio de substrato apropriado que muda de cor sob a ação da enzima. Uma mudança na cor da mistura reacional indica a presença de uma molécula alvo na amostra. A determinação dos produtos das reações enzimáticas no estudo das amostras de teste é realizada em comparação com as amostras de controle.

Antes do advento dos métodos ELISA, o diagnóstico das doenças da tireoide baseava-se na análise do quadro clínico, que nem sempre reflete com clareza a evolução da patologia e se manifesta em fases bastante tardias. Hoje, os métodos ELISA são os principais para identificar anomalias na função da glândula tireoide, fazer diagnóstico diferencial e monitorar o tratamento. 19
Estudo dos níveis de anticorpos antitireoidianos – método imunoquimioluminescente. Foi estudada a prevalência de anticorpos para antígenos do tecido tireoidiano: tireoglobulina, peroxidase tireoidiana e receptor de TSH em pacientes com bócio tóxico difuso e oftalmopatia endócrina. Quando examinado nesses pacientes, nota-se alto nível anticorpos para o receptor de TSH, que diminui durante a terapia tireostática. 20 Foi demonstrado que a determinação de anticorpos para receptor de TSH e tireoglobulina deve servir como critério diagnóstico adicional durante o exame. 21
Métodos para determinar anticorpos para o receptor de TSH:
1. Definição de TBII
1.1. Método radiorreceptor
1.1.1. Usando rTSH suíno (TRAK)
1.1.2. Usando rTSH humano expresso por células CHO (CHO-R)
1.1.3. Usando rTSH expresso em células leucêmicas (K562)
1.2. FACS
1.3. Imunoprecipitação
2. Métodos biológicos para determinação de anticorpos estimulantes (TSAb) e bloqueadores (TBAb)
2.1. Avaliação da produção de cAMP (determinada usando RIA)
2.1.1. em células FRTL-5
etc..................

A atividade funcional das glândulas endócrinas, expressa na intensidade dos processos de biossíntese e secreção de hormônios, pode variar amplamente com vários estados de um determinado organismo. Depende da idade, sexo, hora do dia, estação do ano, influências externas e internas no corpo, transmitidas às glândulas através de sistemas reguladores especiais.

A atividade de cada glândula pode variar significativamente entre tipos diferentes animais. Avaliar o estado funcional das glândulas endócrinas é uma das tarefas mais importantes da endocrinologia teórica e prática, em particular clínica.

Existem várias abordagens diretas e indiretas para avaliar a atividade secretora dos órgãos endócrinos. De maior interesse entre eles são os estudos do funcionamento das glândulas in vivo na experiência crônica, em condições tão próximas quanto possível das fisiológicas. Foi demonstrado que um estudo quantitativo dos processos de biossíntese e secreção em experimentos in vitro geralmente leva a uma subestimação artificial de seus níveis (uma queda de até 10%) em comparação com dados obtidos in vivo em condições de suprimento sanguíneo normal e inervação da glândula, equilíbrio hormonal normal, etc. (Dorfman, Ungar, 1965).

A este respeito, a avaliação quantitativa dos níveis fisiológicos de produção hormonal em experiências diretas in vitro é de pouca utilidade. Também limitado significado fisiológico possuem métodos para medir diretamente a secreção de hormônios no sangue que flui das glândulas endócrinas em condições de experiência aguda. Com efeito, tais estudos são realizados sob condições de imobilização e anestesia do animal, intervenções cirúrgicas severas (abertura de cavidades corporais, canulação de vasos sanguíneos, etc.). Tudo isso distorce drasticamente o curso normal dos processos de biossíntese e secreção de hormônios.

Sem dúvida, os métodos de implantação crônica de tubos de angiostomia (cânulas) em áreas da corrente sanguínea que drenam o sangue das glândulas em estudo merecem atenção (Nelson, Hume, 1955; V.M. Rodionov et al., 1960). No entanto, tais abordagens experimentais não são praticamente viáveis ​​para todas as glândulas, nem para todas as espécies animais, e não podem ser utilizadas em relação a uma pessoa saudável.

Uma das formas mais comuns de quantificar a atividade secretora das glândulas endócrinas em humanos e animais in vivo é determinar a concentração de hormônios no sangue periférico. Este método de avaliação é indireto, pois reflete não só o funcionamento das glândulas, mas também o grau de ligação dos hormônios às proteínas do sangue, a intensidade do metabolismo hormonal e a excreção. Se as funções do fígado e dos rins não forem significativamente alteradas e o nível de proteínas plasmáticas que se ligam aos hormônios detectáveis ​​for constante, a concentração de hormônios no sangue periférico pode estar diretamente correlacionada com a atividade secretora das glândulas correspondentes.

Junto com a determinação da concentração de hormônios no sangue em repouso, a medição das reservas funcionais da glândula, realizada por meio de testes funcionais, pode ser significativa. Assim, para estudar as reservas funcionais do córtex adrenal, é realizado um teste com administração de ACTH, do aparelho insular com administração de glicose, etc. Dentre os métodos de determinação do conteúdo de hormônios no sangue (biológicos, fotométricos, fluorométricos, radioisótopos), os métodos de saturação, ou análise competitiva de ligação protéica, atraem a maior atenção dos pesquisadores.

Esses métodos baseiam-se no deslocamento do mesmo hormônio marcado com trítio (3H) ou iodo radioativo (1251) por um determinado hormônio endógeno de um complexo com uma proteína que o liga especificamente (imune, de transporte ou receptor). O sistema de teste da análise é uma proteína e um hormônio especificamente rotulado ligado a ela. Quanto mais hormônio endógeno estiver contido na amostra de plasma em estudo, maior será a quantidade de marcador que ele desloca do complexo com a proteína.

Métodos de análise de saturação e principalmente métodos radioimunológicos (Berson, Yalow, 1960, 1961), que utilizam anticorpos contra o hormônio como proteínas de ligação, apresentam alta especificidade e sensibilidade. Desta forma, são significativamente superiores a todos os outros métodos de estudo da concentração de hormônios, permitindo a determinação altamente específica de pequenas quantidades (10-12-10-9 g) e por isso, utilizando apenas 10-3-10-1 ml de plasma sanguíneo para análise. A última circunstância é muito importante, uma vez que os hormônios estão contidos no sangue em concentrações muito baixas.

O método de imunoensaio enzimático se difundiu, no qual um hormônio é usado como marcador, ligado covalentemente a uma enzima (fosfatase alcalina, peroxidase), que proporciona uma reação de cor altamente sensível e facilmente reproduzível com o substrato apropriado. Métodos de imunoensaio enzimático, sendo ligeiramente inferiores aos radioimunológicos em sensibilidade, eliminam algum perigo de radiação e a necessidade de usar equipamentos complexos e caros para contagem de radioatividade (Schuurs 1972; Otzuki et al., 1979).

Na tabela 3-9 resume os dados obtidos usando métodos radiológicos, imunoenzimáticos e fluorométricos sobre as concentrações de massa de vários hormônios no sangue de humanos e de algumas espécies animais sob várias condições fisiológicas ou condições patológicas corpo.

Tabela 3. Concentrações de cortisol (F) e corticosterona (B) no plasma sanguíneo de humanos e algumas espécies animais (μg%)

Tabela 4. Concentração de progesterona no plasma sanguíneo de humanos e algumas espécies animais (μg%)

Tabela 5. Concentrações de estradiol (E2) e estrona (E1) no plasma sanguíneo de uma pessoa saudável (ng%)

Tabela 6. Concentração de 1,25-dioxicolecalciferol no plasma sanguíneo de humanos e animais de diferentes espécies

Tabela 7. Concentração de catecolaminas no sangue humano sob diferentes condições corporais (ng%)

Tabela 8. Concentração de triiodotironina (T3) e tetraiodotironina (T4) no sangue de uma pessoa saudável e de animais de diferentes espécies

Utilizando o método radioimunológico, foi estabelecido que a concentração de aldosterona no plasma sanguíneo de uma pessoa saudável com dieta normal é de 7 a 14 ng%, com carga de sal - 1 a 2,5, com dieta sem sal- 15-35 ng%. O mesmo método mostrou que no plasma sanguíneo de um homem sexualmente maduro saudável a concentração de T é 550-800 ng%, DT - 20-40, D4 - 90-175, DEA - 350-850 ng%, no plasma sanguíneo de uma mulher sexualmente madura saudável - respectivamente 40-70, 10-20, 130-200, 450-600 ng%.

Tabela 9. Concentrações de alguns hormônios proteico-peptídeos no plasma sanguíneo de uma pessoa saudável sob várias condições do corpo (ng%)

Outra forma bastante adequada, embora também indireta, de quantificar a atividade secretora das glândulas endócrinas é medir a excreção urinária diária de hormônios ou de seus metabólitos específicos. Quando operação normal fígado e rins, a quantidade de excreção de compostos hormonais pode refletir proporcionalmente a intensidade dos processos secretores nas glândulas correspondentes.

Para determinar hormônios e seus metabólitos em amostras de urina, a análise de saturação e outros métodos são amplamente utilizados experimentalmente e clinicamente. Como muitos metabólitos hormonais são excretados na urina em grandes quantidades (até vários mg por dia), em alguns casos eles podem ser facilmente excretados. determinado colorimetricamente e fluorometricamente.

A determinação de compostos hormonais na urina pode ser difícil se eles forem excretados principalmente na bile e não na urina (por exemplo, em ratos ou camundongos).

Apesar de as medições da concentração de hormônios no sangue e a excreção diária de compostos hormonais na urina em repouso ou durante cargas funcionais poderem caracterizar de forma bastante confiável a intensidade da produção hormonal pelas glândulas endócrinas, as características obtidas com sua ajuda fazem não dão uma ideia dos verdadeiros valores das taxas desses processos.

Valores verdadeiros das taxas de produção hormonal in vivo sob condições crônicas de estudo podem ser obtidos sem intervenção cirúrgica usando o método de diluição do traçador isotópico (Pearlman, 1957). Este método também é indireto. Baseia-se na introdução no organismo estudado de vestígios do hormônio marcado correspondente com alta radioatividade específica e posterior medição da taxa de diluição do rótulo do hormônio exógeno pelo endógeno produzido. A taxa de diluição do rótulo é determinada pela cinética da diminuição da radioatividade específica do hormônio ou de seu metabólito específico detectada no sangue ou na urina. O processamento matemático simples dos dados da medição da cinética de diluição permite calcular a taxa de produção do hormônio em estudo no corpo.

Uma versão tecnicamente mais simples e conveniente do método é estudar a diluição do rótulo em compostos hormonais na urina.

O princípio desta versão do método baseia-se no fato. que o grau de diluição do marcador no sangue por um hormônio endógeno secretado é igual ao grau de diluição do hormônio marcado ou de seu metabólito específico na urina de 24 horas pelo hormônio endógeno não marcado. Com base neste princípio, denotando a radioatividade do hormônio administrado R, a radioatividade do composto hormonal de teste na urina diária, sua quantidade M e a quantidade do hormônio que entra no sangue por dia R.

Obtemos: R/P - r/M. Obviamente, P é a soma da quantidade de hormônio endógeno secretado por dia (Px) e a quantidade de hormônio exógeno marcado (Pr), ou seja, P=Px + Pr. Então, conhecendo os valores de A e Pr e tendo determinado experimentalmente os valores de r e M, calculamos P = RM/r, e Px = P - Pr. Rdg é a taxa de produção hormonal. Como a radioatividade específica de um composto hormonal na urina é a = r/M, R/P = a ou P = R/a

Como o hormônio marcado é introduzido em tais experimentos em pequenas quantidades para não alterar o equilíbrio hormonal endógeno, e geralmente Px » Px, o cálculo Px = P - Pr pode ser praticamente desprezado. Deve-se notar que a igualdade R/P = a é válida se houver um equilíbrio dinâmico entre a taxa de produção hormonal, por um lado, e o seu metabolismo, por outro, e se a taxa de excreção do composto hormonal pelos rins é relativamente constante e a função dos próprios rins é normal.

Determinar a taxa de secreção hormonal a partir da diluição do traçador isotópico injetado no sangue é tecnicamente muito mais difícil, uma vez que requer repetidas coletas de sangue e determinação da radioatividade específica do hormônio de teste nele contido durante um experimento.

Para determinar a taxa de produção hormonal nesta versão do método, é utilizada a equação P = Q/T. onde P é a velocidade de produção, Q é total hormônio no sangue circulante, T é o tempo de renovação, ou seja, renovação completa do hormônio marcado no sangue devido à secreção do hormônio endógeno. Esta equação só é válida se houver um equilíbrio dinâmico entre os processos de produção contínua do hormônio, seu metabolismo e sua retirada do sangue. Como Q = CV, onde C é a concentração do hormônio e V é o volume sanguíneo, então P = CV/T. Os valores de C e K são fáceis de determinar. A maior dificuldade técnica é encontrar o valor de T. Ele é encontrado graficamente extrapolando curvas semilogarítmicas de diluição do hormônio marcado (diminuição de sua radioatividade específica) ao longo do tempo.

Quase mais precisamente determinado a partir do resultado gráficos de linha não o valor T em si, mas T1/2. aqueles. momento da meia substituição do rótulo do hormônio administrado por um endógeno e não rotulado.

As taxas de produção hormonal obtidas usando variações do método de diluição do traçador usando sangue e urina geralmente concordam bem. Deve-se ter em mente que os resultados obtidos por este método podem refletir não apenas a taxa de secreção de hormônios pelas glândulas correspondentes, mas também a taxa de formação de hormônios nos tecidos periféricos, caso isso ocorra, como, por exemplo, em é o caso da testosterona ou da triiodotironina.

As taxas de secreção hormonal pela glândula e sua produção na periferia podem ser diferenciadas entre si. No entanto, este procedimento é tecnicamente difícil e raramente utilizado na prática experimental e clínica.

Usando variações do método de diluição do traçador isotópico, foi estabelecido que vários hormônios são produzidos em taxas que variam de alguns microgramas a dezenas de miligramas por dia, e a magnitude da taxa de produção de cada hormônio pode variar amplamente dependendo das condições fisiológicas. . A velocidade do produto foi mais completamente estudada hormônios esteróides em humanos (Tabela 10).

Tabela 10. Taxa de produção de hormônios esteróides em humanos sob diversas condições patológicas do corpo (dados resumidos)

V. B. Rosen

MÉTODOS PARA ESTUDAR O SISTEMA ENDÓCRINO

Indiretamente, o tamanho da glândula pituitária é avaliado pelo tamanho, formato e estrutura da sela turca nas radiografias. Atualmente conduzindo tomografia computadorizada(TC) e ressonância magnética (MRI).

Para determinar o estado funcional da glândula pituitária, são utilizados métodos radioimunológicos para estudar os níveis de hormônios no sangue da criança.

O hormônio do crescimento é determinado em maior concentração em recém-nascidos, o que está associado ao aumento da lipólise e à diminuição da glicemia no período pós-natal. Destaque natural o hormônio do crescimento ocorre durante o sono noturno. Para avaliar o nível do hormônio do crescimento, é determinado seu conteúdo basal, bem como sua liberação após testes provocativos, por exemplo, administração de insulina.

O maior nível de ACTH também é observado nos recém-nascidos, garantindo processos de adaptação, então seu nível diminui.

O nível de TSH em recém-nascidos é 15-20 vezes maior do que em períodos de idade subsequentes. Pelo contrário, o nível de hormônios gonadotrópicos - LH e FSH - aumenta durante a puberdade tanto em meninos quanto em meninas.

No exame clínicoé possível identificar alguns sinais de disfunção da glândula pituitária, para os quais é necessário avaliar o estado de trofismo dos tecidos da criança, o peso e comprimento do seu corpo e a dinâmica do seu aumento, o desenvolvimento e distribuição do camada de gordura subcutânea, o desenvolvimento de características sexuais secundárias. Além disso, a diurese deve ser medida, a frequência urinária determinada e a densidade relativa da urina avaliada.

METODOLOGIA DE PESQUISA

Ao examinar a superfície anterior do pescoço, você pode ter uma ideia do tamanho da glândula tireoide, que normalmente não é visualizada (veja o grau de aumento abaixo).

No palpação A glândula tireóide precisa prestar atenção ao seguinte. a Tamanho (normalmente a glândula tireoide pode ser palpada, mas o tamanho do seu lóbulo não deve exceder o tamanho da lâmina ungueal do polegar do paciente). Com base no exame e palpação da glândula tireóide, são distinguidos cinco graus de seu aumento:

1º grau - a glândula tireoide não é visualizada e é levemente palpável;

2º grau - a glândula tireoide é palpável e visível em toda extensão do pescoço;

3º grau - a glândula tireóide é claramente visível com a posição habitual do pescoço (“pescoço grosso” devido a um bócio perceptível);

4º grau - a glândula tireóide está significativamente aumentada e se estende além das bordas externas do músculo esternocleidomastóideo;

5 - uma glândula tireóide muito aumentada deforma e desfigura os contornos do pescoço.

* Consistência (normalmente macia-elástica).

* Natureza da superfície (normalmente lisa).

* Natureza do aumento (difuso ou nodular).

* Grau de mobilidade ao engolir (normalmente móvel).

* Presença ou ausência de pulsação (normalmente não há pulsação).

A insuficiência adrenal aguda pode se desenvolver com danos bilaterais ao córtex adrenal ou hemorragia causada por trauma de nascimento, trombose ou embolia venosa (síndrome de Waterhouse-Friderichsen), síndrome DIC. O infarto adrenal hemorrágico ocorre frequentemente no contexto de infecções graves, principalmente meningocócicas, pneumocócicas ou estreptocócicas.

Hemorragias agudas nas glândulas supra-renais podem ocorrer durante estresse, grandes operações, sepse, queimaduras, durante tratamento com anticoagulantes, em pacientes com AIDS. A insuficiência adrenal aguda pode ocorrer com a interrupção súbita do tratamento com corticosteróides - “síndrome de abstinência”, bem como em pacientes após adrenalectomia bilateral.

No insuficiência adrenal crônica(CNN) os pacientes queixam-se de fraqueza geral, fadiga, falta de apetite, necessidade de sal, perda de peso, náuseas ocasionais, vômitos, fezes moles e dor abdominal. São observadas hiperpigmentação da pele e das membranas mucosas, diminuição da força muscular, pressão arterial baixa, hiponatremia e hipercalemia e hipoglicemia.

A insuficiência adrenal crônica geralmente se desenvolve como resultado de um processo autoimune no qual são formados anticorpos contra o tecido adrenal. Além disso, pode estar associado a um processo tuberculoso bilateral nas glândulas supra-renais. Para mais razões raras incluem tumores (angiomas, ganglioneuromas), metástases, amiloidose, infecções (sífilis, doenças fúngicas), intoxicações crônicas, como inseticidas. O córtex adrenal é destruído durante a trombose de veias e artérias, com AIDS, etc.

Formas secundárias (centrais) de insuficiência adrenal podem ser causadas por deficiência de ACTH devido a danos na adenohipófise ou no hipotálamo.

Existem casos de resistência ao cortisol associada a anormalidades nos receptores de glicocorticóides.

Disfunção congênita do córtex adrenal - uma doença hereditária na qual a biossíntese de corticosteróides é prejudicada devido à deficiência congênita de vários sistemas enzimáticos glândulas supra-renais

Existem 3 formas clínicas principais da doença:

· viril - com deficiência de 21-hidroxilase;

perda de sal - com deficiência mais significativa de 21-hidroxilase, quando a formação de glicocorticóides e mineralocorticóides está prejudicada;

· hipertônico - com excesso de 21-hidroxilase.

Fornecer nível normal a hidrocortisona requer maior estimulação das glândulas supra-renais pelo ACTH, o que leva ao aumento da produção de hormônios nas áreas onde a síntese não é prejudicada, principalmente na zona reticular, onde se formam os andrógenos. Na forma hipertensiva, acumula-se uma grande quantidade de 11-desoxicorticosterona e 11-desoxicortisol, que têm efeito hipertensivo.

A forma viril é observada tanto em meninos quanto em meninas. Nas meninas, observa-se virilização da genitália externa em vários graus na puberdade, as glândulas mamárias não se desenvolvem e a menstruação não aparece; Os meninos apresentam hipertrofia peniana, crescimento precoce de pêlos na puberdade, hiperpigmentação na genitália externa, maturação esquelética acelerada e fechamento precoce das placas de crescimento.

Na forma perdedora de sal, os primeiros sintomas observados são distúrbios no equilíbrio eletrolítico: aumento da excreção de sódio e cloro, retenção de potássio. Isso leva a vômitos repetidos, fezes moles, desidratação, hipotonia muscular, cãibras.

Na forma hipertensiva, além da virilização, persiste hipertensão arterial.

Manifestação hipercortisolismo há a doença e a síndrome de Itsenko-Cushing: os pacientes apresentam fraqueza severa, aumento da fadiga, dor de cabeça, dores nas pernas e nas costas, sonolência, sede. Caracterizado por rosto em formato de lua com rubor brilhante nas bochechas, hipertricose, obesidade com deposição predominante de gordura no pescoço em forma de “nuca de alce”, nas costas e abdômen. Listras de alongamento são formadas na pele do abdômen, costas, ombros, quadris e glândulas mamárias - estrias vermelhas ou roxas. A osteoporose se desenvolve, são observadas hipertensão arterial, cardiomiopatia esteróide e diminuição da tolerância à glicose. Linfopenia, eosinopenia, eritrocitose e tendência a aumentar a coagulação sanguínea são detectadas no sangue.

O hipercortisolismo primário é observado em tumores das glândulas supra-renais; suas manifestações são geralmente chamadas de síndrome de Itsenko-Cushing.

O hipercortisolismo secundário é causado pelo excesso de ACTH, que é produzido por um tumor da glândula pituitária anterior, o adenoma basofílico, levando ao desenvolvimento da doença de Cushing.

Substâncias semelhantes ao ACTH podem ser secretadas em focos ectópicos em tumores e metástases de câncer broncogênico, câncer de tireóide, pâncreas, útero, ovários, etc.

Às vezes, a causa do hipercortisolismo pode ser a produção excessiva de hormônios corticosteróides no hipotálamo, o que leva à síntese de uma quantidade aumentada de ACTH na glândula pituitária, acompanhada por hiperplasia do córtex adrenal e aumento da secreção de corticosteróides.

Hipoaldosteronismo(produção insuficiente de aldosterona) é caracterizada por vários sintomas: causados ​​por hipercalemia e hiponatremia e seus efeitos na função renal, do sistema cardiovascular e músculos esqueléticos. Os pacientes apresentam fadiga, fraqueza muscular, hipotensão arterial, desmaios periódicos, bradicardia, bloqueio cardíaco.

O hipoaldosteronismo - deficiência isolada na produção de aldosterona - ocorre raramente - com defeito enzimático na zona glomerulosa do córtex adrenal, bem como após remoção do aldosteroma em uma glândula adrenal e atrofia da zona glomerulosa na outra.

Ocorre pseudo-hipoaldosteronismo devido à baixa sensibilidade do epitélio tubular renal à aldosterona.

Hiperaldosteronismo(produção excessiva de aldosterona) leva à retenção renal de sódio e perda de potássio. Os pacientes apresentam hipertensão arterial e cãibras periódicas em vários grupos musculares. No inicio diurese diáriaé reduzida, então se desenvolvem poliúria, polidipsia, noctúria e resistência a medicamentos antidiuréticos.

O hiperaldosteronismo pode ser primário ou secundário. Hiperaldosteronismo Primário(síndrome de Conn) se desenvolve com um tumor hormonalmente ativo da zona glomerulosa. O hiperaldosteronismo secundário pode ser observado em diversas doenças acompanhadas de hipovolemia e isquemia renal, inclusive após perda sanguínea aguda, insuficiência cardíaca, nefrite e outras doenças renais. O hiperaldosteronismo secundário pode ocorrer em mulheres durante a menstruação, gravidez e lactação, bem como em pessoas de ambos os sexos durante estresse físico severo, sudorese intensa, etc.

O hiperaldosteronismo nas doenças hepáticas está associado ao comprometimento do metabolismo da aldosterona na insuficiência hepática.

No secreção excessiva de catecolaminas Os pacientes apresentam fraqueza, fadiga, sudorese, perda de apetite, perda de peso, dores de cabeça, visão turva, taquicardia, vasoespasmo periférico, hipertensão arterial não tratável, que pode ser crise ou não crise (permanente).

A secreção excessiva de catecolaminas ocorre na feocromocitose e em outros tumores do tecido cromafim. Além disso, observa-se hipersecreção de catecolaminas com grandes atividade física, estresse, síndrome da dor.

Secreção insuficiente de catecolaminas A endocrinopatia não ocorre como uma endocrinopatia independente.

METODOLOGIA DE PESQUISA

Ao examinar uma criança, é dada atenção à altura, deposição de gordura, proporções corporais, desenvolvimento muscular e crescimento do cabelo. A gravidade das características sexuais secundárias é avaliada: nas meninas, o desenvolvimento das glândulas mamárias, o crescimento dos pelos pubianos e o desenvolvimento dos pelos nas axilas, a formação da função menstrual; crescimento de cabelo em meninos axila, púbis e face, crescimento da cartilagem tireóide, alteração no timbre da voz, condição dos testículos, pênis e escroto. O estágio da puberdade é determinado de acordo com Tanner.

Para meninas:

· Estágio I - as glândulas mamárias não estão desenvolvidas, o mamilo sobe. Não há crescimento sexual de pelos;

· Estágio II – estágio de inchaço da glândula mamária; O diâmetro da aréola aumenta. Crescimento de cabelos esparsos, longos e levemente pigmentados; o cabelo é liso, ocasionalmente cacheado, localizado ao longo dos lábios;

· Estágio III - maior alargamento da glândula mamária e da aréola sem separar seus contornos. O cabelo escurece, fica mais áspero, mais crespo e se espalha além da sínfise púbica;

· Estágio IV - protrusão da aréola e do mamilo com formação de tubérculo secundário acima do contorno da glândula. O crescimento dos pelos sexuais é do tipo feminino, mas não cobre toda a região pubiana;

· Estágio V - as glândulas mamárias correspondem às de uma mulher adulta; A aréola se ajusta ao contorno geral da glândula mamária. O crescimento dos pelos sexuais ocupa toda a região suprapúbica.

Para meninos:

· Estágio I - pênis, testículos e escroto das crianças. Não há crescimento sexual de pelos;

· Estágio II – aumento dos testículos e escroto; o pênis geralmente não aumenta, a pele do escroto fica vermelha. Crescimento de cabelos esparsos, longos e levemente pigmentados; o cabelo é liso, ocasionalmente cacheado, principalmente na base do pênis;

· Estágio III - aumento adicional dos testículos e escroto e aumento do pênis, principalmente em comprimento. O cabelo fica mais escuro, mais áspero e mais crespo; estende-se ligeiramente além da sínfise púbica;

· Estágio IV – maior aumento dos testículos e escroto; o pênis aumenta, principalmente em diâmetro. O crescimento dos pelos sexuais é do tipo masculino, mas não ocupa toda a região pubiana;

· Estágio V - a genitália externa em forma e tamanho corresponde aos órgãos de um homem adulto. O crescimento dos pelos sexuais ocupa toda a região suprapúbica.

Ao examinar os órgãos genitais, preste atenção à exatidão de sua estrutura. Nos meninos, anomalias como hipospádia (fenda uretral inferior), epispádia ( fenda superior uretra), hipoplasia peniana (micropênis). Nas meninas, são possíveis agenesia, hipoplasia ou hipertrofia do clitóris, fusão dos pequenos e grandes lábios, fusão do hímen, fenda do clitóris, aplasia dos lábios e do hímen.

Durante a palpação em meninos, é determinada a presença de testículos no escroto, avaliada sua consistência e tamanho e, em seguida, comparados com os padrões de cada idade.

Se necessário, é realizado um exame ultrassonográfico dos órgãos pélvicos nas meninas e dos testículos nos meninos.

Para avaliar a função das gônadas, é determinado o nível de hormônios sexuais no sangue e na urina.

Inspeção. O exame durante o estudo de pacientes endócrinos é muito importante grande importância, e muitas vezes, à primeira vista para um paciente, pode-se reconhecer a doença pela aparência geral do paciente ou por sinais individuais da doença (doença de Graves, mixedema, acromegalia, gigantismo, distrofia hipofisária, doença de Addison) .

Ao examinar, você precisa prestar atenção aos seguintes sinais.

1) Crescimento corporal, bem como os tamanhos e proporções de suas partes individuais: desvios significativos no crescimento devem direcionar os pensamentos do médico para disfunções do apêndice cerebral, tireóide, glândulas reprodutivas ou timo; preservação ou violação da proporcionalidade em certas partes do corpo e a presença de outras características características permitem esclarecer a patogênese dos distúrbios do crescimento; um aumento desproporcional nas partes distais do corpo (nariz, lábios, queixo, mãos, pés) indicará hiperfunção da glândula pituitária anterior (acromegalia), etc.

2) Gordura dos pacientes e características da deposição de gordura. A obesidade está mais frequentemente associada à diminuição da função da tireoide, glândula pituitária ou gônadas, emagrecimento com hipertireoidismo, danos ao apêndice cerebral (doença de Simmonds) e diminuição da função do pâncreas (diabetes). A distribuição da gordura no tecido subcutâneo em casos típicos muitas vezes nos permite aproximar-nos do diagnóstico patogenético da obesidade endócrina: deposição preferencial de gordura na cintura pélvica ( Parte inferior abdômen, nádegas, coxas) e no peito é característico da obesidade hipofisária e sexual; uma distribuição mais ou menos uniforme de gordura por todo o corpo indicará obesidade da tireoide. A perda severa de peso é observada no hipertireoidismo, na doença de Addison e especialmente na doença de Simmonds (caquexia hipofisária).

3) Pelos corporais. Devido à dependência do crescimento do cabelo de influências hormonais, principalmente das gônadas, da glândula tireóide, do córtex adrenal e do apêndice cerebral, a condição e a natureza da linha do cabelo são importantes. sinais de diagnóstico para distúrbios secreção interna, tais como: tipo feminino de crescimento de cabelo com eunucoidismo, crescimento aprimorado cabelos com hipertireoidismo e acromegalia, hipertricose (hirsutismo) com tumores do córtex adrenal, queda de cabelo com mixedema, etc.

4) Condição da pele - sensibilidade e brilho na doença de Graves, rugosidade e palidez no mixedema, cor marrom escura na doença de Addison, etc.

5) Rosto, sua expressão e alterações nos olhos.

Das glândulas endócrinas, apenas a glândula tireóide e os testículos são acessíveis ao exame direto: a redução e o aumento desses órgãos podem ser facilmente detectados pelo exame.

Palpação. Por palpação, você pode examinar as mesmas duas glândulas endócrinas - a tireóide e as glândulas reprodutivas masculinas, determinando seu tamanho, densidade, uniformidade ou irregularidade de consistência (nodularidade), dor, etc. sinta também as glândulas reprodutivas femininas - os ovários.

A palpação da pele na doença de Graves e no mixedema é de grande importância diagnóstica: na primeira a pele é fina, macia, lisa (aveludada), úmida e quente, na segunda - espessa, densa, áspera, seca e fria .

Percussão. Com o auxílio da percussão, é possível determinar o struma (bócio) localizado retroesternalmente (retroesternalmente), sendo este, aparentemente, o único uso da percussão no estudo das glândulas endócrinas.

Auscultação. A ausculta no estudo das glândulas endócrinas também encontra apenas uma aplicação, nomeadamente no estudo de uma glândula tiróide aumentada, quando se pode ouvir um ruído gorgolejante sistólico surgindo nos seus vasos arteriais dilatados.

Medidas antropométricas. As medidas antropométricas podem servir para confirmar objetivamente aquelas observadas durante o exame ou para identificar diferenças sutis relacionadas ao sistema endócrino nas proporções e na estrutura corporal. Assim, as diferenças de género reflectem-se nas mulheres em comparação com os homens pelo comprimento relativamente mais curto dos membros, menor largura dos ombros e tamanhos grandes pélvis Além disso, o comprimento excessivo das pernas é característico do eunucoidismo, e pernas relativamente curtas são características do início da puberdade. As determinações de altura e peso também fornecem dados numéricos úteis para avaliar influências endócrinas e patologia endócrina.

Determinação do metabolismo basal. A determinação do metabolismo basal é de grande importância diagnóstica para uma série de doenças das glândulas endócrinas, especialmente da tireoide. Por metabolismo basal entendemos a quantidade mínima de energia, expressa em calorias, que o corpo necessita para manter as suas funções vitais básicas, ou seja, circulação sanguínea, respiração e Temperatura constante corpos. Portanto, a determinação da taxa metabólica basal é realizada com repouso físico completo e com o estômago vazio (não antes de 12 horas após a última refeição). O princípio de determinação da taxa metabólica basal é que, por meio de equipamentos especiais, sejam determinados diretamente os valores da ventilação pulmonar, ou seja, a quantidade de ar exalado e sua composição, durante um período de tempo conhecido (geralmente 10 minutos). Em seguida, usando tabelas especiais, calcula-se a quantidade de oxigênio absorvido e dióxido de carbono liberado e sua proporção (coeficiente respiratório) e, em seguida, o número necessário de calorias por hora por 1 kg de peso (normalmente cerca de 1 caloria) ou por 1 m2 de superfície corporal (normalmente cerca de 40 calorias). Um aumento no metabolismo basal em mais de 10-15% indicará um aumento patológico indubitável e é mais frequentemente observado no hipertireoidismo ou na doença de Graves, nos quais um aumento de 30-50-80-100% é uma ocorrência comum. Uma diminuição no metabolismo basal em 15-30-50% em relação ao normal é característica de hipotireoidismo e mixedema, distrofia hipofisária e doença de Simmonds.

Método de raios X. O método de exame radiográfico permite facilmente determinar alterações no esqueleto ósseo e julgar doenças endócrinas a partir delas. Assim, é possível reconhecer: 1) tumores da glândula pituitária por alterações no tamanho e formato da sela turca (seu alargamento e aprofundamento, destruição das bordas); 2) acromegalia - por espessamento dos ossos e alargamento das cavidades aéreas do crânio, por grande desenvolvimento"exostose na circunferência das articulações; 3) eunucoidismo - devido à ossificação insuficiente das suturas ósseas e ossificação retardada das zonas epifisárias; 4) hipergenitalismo - devido à ossificação acelerada das epífises.

A radiografia também pode identificar uma glândula tireoide aumentada localizada retroesternalmente (bócio retroesternal).

Pesquisa laboratorial. De todos os dias pesquisa de laboratório, usado para fins diagnósticos no reconhecimento de doenças endócrinas, na maioria das vezes temos que lidar com exames de urina e sangue.

Exame de urina- sua quantidade diária, Gravidade Específica e o teor de açúcar nele contido - é essencial no reconhecimento do diabetes mellitus e do diabetes insipidus.

Teste de sangue também pode desempenhar um papel conhecido no reconhecimento de certas doenças endócrinas. Por exemplo, a anemia secundária é frequentemente um dos sintomas de insuficiência da glândula tireóide (mixedema) ou das glândulas supra-renais (doença de Addison). Um certo grau de poliglobulia ocorre na doença de Graves. Mudar fórmula de leucócitos em direção à linfocitose é característico da disfunção da glândula tireóide em uma direção ou outra - independentemente (doença de Graves, mixedema). Em outros distúrbios endócrinos, o hemograma também muda, mas essas alterações ainda não foram suficientemente estudadas.

Métodos de pesquisa funcional. Diagnóstico funcional glândulas endócrinas ainda não adquiriu significado prático. Dos utilizados para este fim vários métodos(ver orientações específicas sobre endocrinologia) valor mais alto são mais complexos: 1) determinação do metabolismo basal para avaliar o estado funcional da glândula tireoide; 2) determinação do efeito dinâmico específico dos alimentos - para identificar a capacidade funcional da glândula pituitária e 3) estudo das curvas glicêmicas do sangue - para avaliar a função do pâncreas, glândulas supra-renais e glândula tireóide.

Síndromes endocrinopáticas
As principais síndromes endocrinopáticas baseiam-se principalmente nos fenômenos de hiperfunção ou hipofunção de uma ou outra glândula endócrina.

I. Síndromes da tireoide.
1. Síndrome hipertireoidiana(hipertireoidismo, hipertireoidismo) se manifesta por aumento do volume da glândula tireoide, bócio (sua hiperplasia), aumento da freqüência cardíaca - taquicardia e protrusão globos oculares- olhos esbugalhados (aumento do tônus ​​​​do sistema nervoso simpático).

Essa tríade de sintomas é característica de casos graves de hipertireoidismo, a chamada doença de Graves. Além deles, sintomas muito importantes do hipertireoidismo são perda de peso, dependendo do aumento do metabolismo, tremores, diarreia, sudorese, fenômenos vasomotores e fenômenos de aumento da excitabilidade neuropsíquica associados à superexcitabilidade dos sistemas nervosos autônomo, simpático e parassimpático.

2. Síndrome hipotireoidiana(hipotireoidismo, hipotireoidismo) é frequentemente caracterizado por uma diminuição no volume da glândula tireóide, uma desaceleração da freqüência cardíaca e globos oculares afundados, depois uma tendência à obesidade, prisão de ventre, pele seca, uma diminuição na excitabilidade nervosa e mental geral e, finalmente , uma alteração peculiar na pele e tecido subcutâneo, que aparecem infiltrados, de consistência pastosa e densa, como se estivessem inchados, mas quando pressionados não deixam caroços; este é o chamado inchaço mucoso, daí o nome dos casos graves desta patologia - mixoedema.

II. Síndromes da paratireóide.
1. Síndrome hiperparatireóidea(hiperparatireoidismo, hiperparatireoidismo) é raro, é acompanhado de pstercalcemia e clinicamente, devido à perda de quantidades significativas de sais de cálcio pelo esqueleto, se expressa por atrofia e degeneração fibrosa dos ossos com formação de cavidades nos mesmos, com suas curvaturas e fraturas e com subsequente deformação do esqueleto "(osteíte fibrocystis geral - osteíte ou osteodistrofia fibrosa cística geral é ata - doença de Recklinghausen.

2. Síndrome tipoparatireóidea(hipoparatireoidismo, hipoparatireoidismo) é observado com muito mais frequência; A hipocalcemia desempenha um papel significativo em sua patogênese (bem como uma mudança no equilíbrio ácido-base para o lado alcalino - alcalose e distúrbio do metabolismo das proteínas). Manifestação clínica desta síndrome são excitabilidade aumentada principalmente sistemas músculo-esqueléticos sistema nervoso (quando o nível de cálcio no sangue diminui para 7 mg% e menos) e tendência a convulsões tetânicas. Essas convulsões se desenvolvem mais frequentemente nas extremidades superiores (os antebraços estão dobrados, os dedos estão unidos na posição de “mão do obstetra”), menos frequentemente as convulsões envolvem e membros inferiores ou estender também para o rosto, trato gastrointestinal ou laringe. Convulsões duram de alguns minutos a 1-2 horas e são facilmente repetidos. Na clínica, essa síndrome é chamada de espasmofilia ou tetania.

III. Síndromes hipofisárias.
A interrupção das funções complexas da glândula pituitária acarreta o desenvolvimento de uma série de síndromes hipofisárias ou hipofisárias. Apresentaremos aqui apenas os mais importantes clinicamente.

A. Hiperfunção da glândula pituitária, mais precisamente, seu lobo anterior (hiperpituitarismo) pode levar ao desenvolvimento de três síndromes hipofisárias: a mais famosa e comum acromegálica, a chamada síndrome de Cushing, e a diabética.

1. A acromegalia é baseada no crescimento semelhante a um tumor (adenoma) de células eosinofílicas da glândula pituitária anterior e na superprodução do hormônio do crescimento por elas secretado. Esta síndrome é caracterizada por mãos, pés e crânio grandes, cristas superciliares, maçãs do rosto, nariz e queixo; Ao mesmo tempo, não só os ossos, mas também as partes moles, incluindo os lábios e a língua, aumentam.

Se esta hiperfunção da glândula pituitária aparecer em infância, então há um aumento acentuado no crescimento geral, que, em última análise, excede mais ou menos significativamente a norma fisiológica - desenvolve-se o gigantismo. O gigantismo, portanto, é como a acromegalia da infância.

A síndrome oposta, rara, associada à hipofunção das células eosinofílicas da glândula pituitária anterior é a acromicria (micros - grego - pequeno), expressa na diminuição do volume das extremidades, principalmente dos braços.

2. A síndrome de Cushing é baseada na proliferação (adenoma) de células basofílicas do lobo anterior e na superprodução de hormônios hipofisários endocrinotrópicos (estimulando a atividade de outras glândulas endócrinas). Os principais sintomas desta síndrome são obesidade da face e tronco (mas não dos membros) com formação de cicatrizes na pele e hipertricose (estimulação do córtex adrenal), hipertensão arterial e hiperglicemia (estimulação da medula adrenal), perda óssea - osteoporose (estimulação das glândulas paratireoides).

3. O diabetes mellitus hipofisário está associado à superprodução de um hormônio que regula o metabolismo dos carboidratos e tem efeito oposto à ação da insulina. Esta forma de diabetes geralmente acompanha a acromegalia.

B. Hipofunção da glândula pituitária(hipopituitarismo) está subjacente às quatro síndromes a seguir:

1) obesidade hipofisária;

2) caquexia hipofisária;

3) crescimento anão hipofisário;

4) diabetes insípido.

Tomamos as síndromes endocrinopáticas descritas em sua forma isolada. Mas, como mencionado acima, as glândulas individuais fazem parte de um único sistema endócrino. Portanto, em essência, não existem disfunções isoladas de apenas uma glândula. Inevitavelmente, uma série de outras glândulas mais estreitamente relacionadas com a primeira também estão envolvidas no processo. Portanto, quase todos doença endócrina tem caráter de lesões múltiplas das glândulas - de natureza plurilandular. No entanto, também se distinguem as síndromes pluriglandulares no sentido estrito da palavra, que incluem aqueles distúrbios intrassecretores em cuja patogênese não é possível identificar o protagonismo dos danos a uma ou outra glândula, como infantilismo, envelhecimento prematuro, depleção endócrina.

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1. Reclamações do sistema nervoso central

2. Do lado do SSS

3. Da área genital

4. Queixas por distúrbios metabólicos

1 – irritabilidade, aumento excitabilidade nervosa, ansiedade sem causa, insônia, distúrbios neurovegetativos, tremores, sudorese, sensação de calor, etc. (bócio tóxico difuso, doença da tireoide); hipotireoidismo – letargia, indiferença, indiferença, sonolência, comprometimento da memória.

2 – falta de ar, palpitações, dores na região do coração, interrupções da função cardíaca, alterações no pulso, pressão arterial.

3 – diminuição da função sexual. Menstruação irregular, impotência e diminuição da libido levam à infertilidade.

4 – perda de apetite. Mudança no peso corporal. Poliúria, sede, boca seca. Dor nos músculos, ossos, articulações.

Podem queixar-se de crescimento lento (com doenças da glândula pituitária); mudanças na aparência. Eles podem reclamar de rouquidão, voz áspera e dificuldade para falar. Alterações na pele, cabelos, unhas.

Exame objetivo.

Mudanças na aparência do paciente e nas características de seu comportamento. Com difuso bócio tóxico- mobilidade, agitação, gestos animados, expressão facial assustada, exoftalmia.

Hipotireoidismo – lentidão, baixa mobilidade, rosto inchado e sonolento, expressões faciais ruins, retraimento de salão, indiferença, etc.

Mudanças na altura do paciente, mudanças no tamanho e proporção das partes do corpo - crescimento gigantesco (acima de 195 cm), com doenças da hipófise, assim como das gônadas, desenvolvem-se de acordo com o tipo feminino. Altura anã - menos de 130 cm - proporções corporais de crianças. Acromegalia - uma doença da glândula pituitária - um aumento no tamanho dos membros - uma cabeça grande com grandes características faciais.

Mudanças nos pelos do corpo – com patologia das gônadas – afinamento do crescimento dos pelos. Envelhecimento prematuro e queda de cabelo.

Crescimento acelerado cabelo.

Características de deposição de gordura e padrão nutricional - perda de peso até caquexia (DTC), com hipotireoidismo - ganho de peso, obesidade. Deposição predominantemente de gordura na cintura pélvica. Doenças da glândula pituitária.

Alterações na pele – a pele fica fina, macia, quente, úmida – DTS. No hipotireoidismo, a pele fica seca, escamosa, áspera e pálida.

Palpação. Tireoide. Tamanho, consistência, mobilidade.

1. 4 dedos dobrados de ambas as mãos, colocados superfície traseira pescoço e o polegar na superfície frontal.

2. São oferecidos ao paciente movimentos de deglutição, durante os quais a glândula tireoide se move junto com a laringe e se move entre os dedos.

3. O istmo da tireoide é examinado deslizando os dedos ao longo de sua superfície, de cima para baixo.

4. Para facilitar a palpação de cada um dos lobos laterais da glândula, pressione a cartilagem tireóide do lado oposto. Normalmente, a glândula tireoide não é visível e geralmente não é palpável.

Às vezes, o istmo pode ser palpado. Na forma de um rolo liso e indolor, deitado transversalmente, de consistência elástica, não mais largo que o dedo médio da mão. Durante os movimentos de deglutição, o fluido sobe e desce 1-3 cm.

Existem três graus de aumento da tireoide:

0 - sem bócio.

I. A glândula tireóide não é visível, mas é palpável. Além disso, seu tamanho é maior que a falange distal do polegar do paciente.

II. A glândula tireóide é visível e palpável. "pescoço grosso"

Resultados da palpação:

1. A glândula tireoide está uniformemente aumentada, de consistência normal, indolor e deslocada.

2. A glândula tireóide está aumentada, com nódulos, indolor, deslocada - bócio endêmico.

3. Tireóide com formações nodulares ou tuberosas densas, fundidas à pele, crescendo nos tecidos circundantes e não se desalojando ao engolir - câncer de tireoide

Métodos laboratoriais.

Química do sangue.

Exame de sangue para hormônios - TSH, T3 - triiodotiranina, T4 - triiodotiraxina.

Determinação de glicose no sangue. TOTG – teste oral de tolerância à glicose.

Exame de urina. Análise geral de urina. Quantidade diária urina para açúcar. São fornecidas 2 latas - uma de 3 litros e a segunda de 200 ml. antes do exame habitual regime de bebida. Sem urina noturna. Agitado. Despeje em uma jarra pequena. Anexamos a direção, com a inscrição da quantidade de urina.

Estudos instrumentais. Raio X. Ultrassom.

Síndromes clínicas:

1. Síndrome de hiperglicemia

2. Síndrome de hipoglicemia

3. Síndrome de hipertireoidismo

4. Síndrome de hipotireoidismo

5. Síndrome de hipercortisolismo

6. Síndrome de hipocortisolismo